间充质干细胞（MSC）广泛应用于基础研究和临床转化，其体外培养操作对实验结果有重要影响。以下是一些日常工作中总结的MSC培养小贴士及注意事项：
01 培养基选择很关键
MSC对微环境非常敏感。传统的胎牛血清（FBS）体系存在批次差异大、实验重复性低等问题。因此，越来越多实验室青睐成分明确的无血清培养基，扩增稳定、细胞状态佳、安全性高。例如，一些双组分完全培养基，适合多种MSC来源，省却血清筛选等待和试验。
02 规范操作，避免污染
MSC对污染极为敏感。操作前后保持无菌，定期检查支原体和真菌非常必要。所有器材、试剂使用前后均需消毒，尽量减少开瓶次数，液体添加动作要轻柔，避免飞溅。
03 接种密度与传代时间
细胞密度应控制在70-80%融合时传代。过密会导致MSC分化，过稀则难以扩增。密度适宜更利于细胞贴壁及增殖。
04 关注细胞形态和活性
健康的MSC应呈现纤维样形态，细长均一。多角形和颗粒感明显的细胞不宜过多，提示培养条件需优化。日常可用流式分析检测CD90、CD105、CD73，阴性指标（如CD45、CD19、CD34等）阳性率宜控制在2%以下。
05 冷冻复苏有细节
两点需注意：冻存液应一次分装到位，避免反复冻融；解冻过程要迅速，尽快移除DMSO以保护细胞活性。冻存、复苏成功率与培养体系可靠度密切相关。
06 三系分化能力检验
高质量的MSC不只是扩增快，脂肪、骨、软骨三系分化能力同样重要。油红、茜素红和阿利新蓝染色检验分化效果，是判断体系和操作流程的重要参考。
07 培养体系稳定性
无血清培养基近年在MSC实验中应用越来越广，比如经过严格检测、成分明确的扩增试剂盒，支持细胞长期扩增而不失活性和分化潜能。此类产品细胞形态更好，标志物阳性率高，分化潜力稳定，特别适合对实验一致性和安全性有高要求的项目。
日常培养里，除了细致的操作和及时的状态监测，选用高品质的培养基也是“事半功倍”的秘诀。像吉诺生物的MSC无血清扩增试剂盒和基础培养基，就在不少合作实验室表现出色——细胞扩增速度快，分化能力强，是目前市面上比较值得关注的选择之一。如果项目对细胞批次稳定性、安全性或无异源组分有要求，不妨纳入候选考虑。
