皮下荷瘤（subcutaneous tumor）实验是将肿瘤移植到同种或异种动物的皮下形成肿瘤块，利用对动物体内肿瘤的生长情况的观测，评估肿瘤细胞/组织在动物体内的增殖能力，一般用于抑制肿瘤生长（细胞增殖）的药物的筛选检测，目前已成为检测致瘤潜力，评估体内新型抗癌药物的通用方法。
1. 实验原理
皮下荷瘤实验是将肿瘤细胞接种到动物侧腹部或背部皮下，利用肿瘤细胞吸收体内营养进行细胞增殖后，形成肉眼可见且可测量的肿瘤组织，通过观察和监测肿瘤组织的形成情况，评估肿瘤细胞在动物体内的增殖能力及抗肿瘤药物疗法的可行性。
2. 实验步骤
2.1选择肿瘤细胞系和小鼠品系
在肿瘤细胞系和小鼠品系的选择上，需要考虑以下几个方面：
a. 不同肿瘤细胞系的成瘤率不同，需选取成瘤率高的细胞系；
b. 根据实验目的选择人源或鼠源细胞系，一般鼠源细胞系更易成瘤，人源细胞系更贴近人类肿瘤生长情况；
c. 小鼠品系的选择要依据细胞系来源：人源细胞系为异种移植，应选择免疫缺陷的小鼠，如nude、NOD/scid，NSG等；鼠源细胞系为同种移植，应选择与肿瘤细胞系来源一致的小鼠。
2.2肿瘤细胞的传代扩增培养
取冻存于液氮的肿瘤细胞复苏并扩增，培养，确保肿瘤细胞的活力和良好的生长状态。
2.3计算细胞接种量
根据经验，一般鼠源肿瘤细胞接种2～100万个/只，而人源肿瘤细胞则需要200-1000万个/只以上，具体可参考相关文献。根据所需要实验的小鼠总只数提前计算确定细胞数量。
2.4准备小鼠
一般选择5-6W小鼠，小于4W动物可能不耐受而过早死亡，大于6W免疫力会增强，不易成瘤；每批实验只用同一性别动物，通常雌雄均可，但是根据研究的肿瘤类型及肿瘤细胞系选择（乳腺癌等要选择雌性，前列腺癌等要选择雄性）
2.5皮下荷瘤模型的建立
收集体外培养的指数生长期的肿瘤细胞，显微镜下常规细胞计数，调整细胞密度，无菌条件下接种于健康动物皮下。接种部位一般选择血管丰富且易操作的部位，如腋下、腹股沟、侧腹部及颈背部等部位。
2.6实验分组和给药
一般接种7-10天，到瘤体长至1cm左右，可根据实验目的进行分组和给药。一般皮下荷瘤主要用于抗肿瘤药物的检测，因此分组常为对照组，阳性药物组，低、中、高剂量药物组。
2.7观测小鼠体重和瘤体体积变化
将小鼠放回原饲养笼，继续饲养。定期观察小鼠状态及肿瘤生长情况，以游标卡尺按照1-2次/周进行肿瘤大小的测量，记录肿瘤体积及小鼠体重变化曲线。
3. 结果示例
将结肠癌细胞（HCT116）感染慢病毒shSeptin4后，接种于裸鼠腋下，每3天测量瘤体体积，4周后解剖分离瘤体并称重分析。
4. 参考文献
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